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Services proposés par iVector

La plateforme de vectorologie (iVector) crée et produit à façon des outils viraux et non viraux pour le transfert de gènes.

Services proposés par iVector

La plateforme de vectorologie (iVector) crée et produit à façon des outils viraux et non viraux pour le transfert de gènes.

Construction plasmidique

La plateforme propose la possibilité de construire un vecteur plasmidique à façon. Ce plasmide sera donc adapté au mieux à votre projet de recherche.

Construction et production de Vecteurs lentiviraux

Les vecteurs lentiviraux sont dérivés du virus de l’immunodéficience humaine (VIH). Ils ont la capacité d’intégrer leur génome dans une cellule (max 8kb) mais ont été délestés de leur capacité réplicative. De ce fait, l’ADN intégré à la cellule sera transmis au cours de la division cellulaire aux cellules filles sans production de particules virales.

La production est effectuée par transfection transitoire de plasmides helpers et du plasmide contenant votre transgène dans des cellules humaines. Les particules virales seront produites par l’utilisation de la machinerie cellulaire et récupérées par ultracentrifugation.

Vous pouvez nous confier la construction de votre plasmide-transgène, ou nous donner directement votre plasmide déjà construit.

3 tailles de productions vous sont proposées :

  • Mini production : environ 50µL de vecteur viral
  • Maxi production : environ 150 à 200µL de vecteur viral
  • Giga production : environ 300 à 400µL de vecteur viral

3 Types de titrations sont à votre disposition :

  • Titration en ELISA de détection de la protéine de capside P24 (quantification de la quantité de particules physiques)
  • Titration par qPCR après infection de cellules (Quantification du nombre de particules virales capables d’infecter une cellule)
  • Titration par cytométrie en flux si présence d’un fluorochrome (Quantification du nombre de cellules infectées capables d’exprimer le transgène intégré)

Construction et production de vecteurs AAVs

Les vecteurs AAVs sont dérivés de virus adéno-associés. Ils permettent de transférer une petite taille d’ADN (4kb) et sans intégration dans l’ADN de la cellule cible. Cela permet d’éviter une insertion non contrôlée qui pourrait perturber la fonction cellulaire.

La PFV accepte vos vecteurs AAV-transgène prêt a l’emploi mais peut prendre aussi en charge la construction a façon de vos vecteurs AAV-gène d’intérêt et enchainer sur la production des particules virales AAV de différents sérotypes.

Mise à disposition d’équipement

La plateforme se compose d’un laboratoire L1 avec une zone dédiée à la bactériologie pour la construction de plasmide.

Nous avons également une zone de manipulation L2 et L3 pour la manipulation et production des vecteurs viraux.